Human Serum Albumin(Mitsubishi Tanabe Pharma Corp.)

点击关注👆｜专注全球生物医药投资 2026年8月18日，普罗吉公司自主研发的重组人血清白蛋白注射液（rHSA，用于治疗肝硬化腹水）的新药上市申请（NDA）正式获得国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）受理。 此次受理标志着该产品的审评审批程序进入实质性阶段，也是普罗吉在重组蛋白药物自主创新与产业化道路上取得的又一关键进展。 倚锋资本于2023年参与普罗吉融资，展望未来，倚锋将持续深耕生物医药领域，以深度研究为导向，助力更多创新药实现从实验室到国际市场的跨越，为患者带来更多临床获益。 END 【免责声明】 本文内容仅代表本公司基于当前公开信息及被投企业提供资料的观点，不构成任何投资建议、医疗建议或对特定企业业绩的保证。投资有风险，入市需谨慎，读者应基于公开信息独立判断。未经授权，禁止转载或用于商业用途。 ✦ 推荐阅读 ✦ 泰诺麦博科创板IPO 北芯生命科创板IPO 禾元生物科创板IPO 拨康视云香港主板IPO 华昊中天香港主板IPO 盛禾生物香港主板IPO 荃信生物香港主板IPO 思路迪医药香港主板IPO 和元生物科创板IPO 亚虹医药科创板IPO 期待您的 点赞 在看

孙盼1 闫晨2 陈永莹1 蒋鹏1 秦亮2 杨波波2 邓晋朝2 李长清1 王宗奎1 马莉1 1中国医学科学院输血研究所，四川成都 610052；2广东双林生物制药有限公司，广东湛江 524081 【摘要】 人血白蛋白（human serum albumin, HSA） 是人血浆中含量最丰富的蛋白质，由肝脏合成，HSA会发生多种酶促或非酶促的翻译后修饰，这些修饰可引起其结构的改变。HSA主要生理功能包括维持血浆胶体渗透压、结合与转运物质、抗氧化、抗炎等。HSA的生物学功能与结构密切相关。在多种疾病状态下，HSA的结构会发生改变，从而导致其功能受损，进而影响疾病进程及治疗效果。目前临床应用的人血浆来源白蛋白（plasma-derived HSA, pdHSA） 由健康人血浆分离纯化制成，广泛用于各种危重患者的治疗。近年来，随着生物技术的发展，重组人血清白蛋白（recombinant HSA, rHSA）逐渐进入临床应用，其在结构、生物学功能及安全性等方面均与pdHSA存在一定差异。本文系统综述HSA主要的翻译后修饰和功能调控，阐述其在不同疾病状态下结构与功能的改变，并比较pdHSA和rHSA的异同，帮助我们更全面、系统地认识HSA，为HSA制品的创新应用和精准医学实践奠定理论基础。 【关键词】 人血白蛋白 翻译后修饰 功能 疾病 血源人血白蛋白 重组人白蛋白 【英文摘要】（略） 人血白蛋白（human serum albumin, HSA，以下简称白蛋白）是人血浆中含量最丰富的蛋白质，占血浆总蛋白质的50%～60%，正常生理状态下其含量可达35～50 g/L。白蛋白具有多种生理功能：维持体液及血液胶体渗透压、结合与运输多种物质、维持血管内皮功能完整性、抗氧化、抗血栓、免疫调节与抗炎等[1-2]。目前临床上应用的HSA制品主要是从健康人血浆中经低温乙醇法或层析法分离纯化并经病毒灭活制成的一种人血浆来源白蛋白（pdHSA），自第二次世界大战期间首次进入临床后，其在临床中的应用逐渐普及开来。在我国，HSA制品的适应证包括血容量不足的紧急治疗，显著的低蛋白血症（≤30 g/L） 的治疗，新生儿高胆红素血症的治疗，急性呼吸窘迫综合征的治疗以及心肺分流术、特殊类型血液透析、血浆置换的辅助治疗。美国FDA批准的适应证相比我国增加了急性肾病（辅助治疗）、卵巢过度刺激综合征和预防肝硬化腹水穿刺术后循环功能障碍，但不包括血浆置换的辅助治疗[3]。白蛋白主要由肝脏合成、分泌，具有较长的半衰期，通常为17～20 d。在半衰期内的代谢过程中以及在一些病理状态下，白蛋白的结构会发生变化，这些变化可能会影响其正常生理 功能[4]。 pdHSA受制于原料血浆来源有限，难以满足不断增长的临床需求，且理论上存在传播病原体的潜在风险。因此近年来应用现代基因工程技术获得重组人血清白蛋白（rHSA）（特指临床静脉注射用rHSA）成为研发热点并取得显著进展。近两年我国自主研发的rHSA经过临床试验后陆续在不同国家获批上市[5-6]。2024年4月，通化安睿特生物制药股份有限公司采用毕赤酵母表达系统制备的rHSA注射液率先在俄罗斯获批上市，后又获批在吉尔吉斯斯坦上市；2025年7月18日，武汉禾元生物科技股份有限公司研发的水稻源rHSA注射液在我国获批上市。与此同时，针对rHSA安全性和疗效，全球多个临床中心正在开展Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验[7]。rHSA与pdHSA具有相似的结构和生理功能，被认为是pdHSA的重要临床替代品，但两者在来源、翻译后修饰、潜在的生物学功能等方面仍存在一定差异。 本文围绕白蛋白的翻译后修饰、主要生理功能调控、其与疾病的相关性以及pdHSA与rHSA的异同等进行综述，为更全面了解白蛋白及其更充分合理的临床应用提供参考。1 白蛋白的结构特征及主要翻译后修饰 白蛋白的编码基因位于人类4号染色体的长臂上，由22 306个碱基对组成，其GeneBank参考序列号为NC_000004.11。白蛋白一级结构简单，是一种单链、非糖基化蛋白质。成熟的白蛋白由585个氨基酸残基组成，分子量约为66.5 kDa。每个白蛋白分子含有35个半胱氨酸（Cys）残基，其中34个Cys残基通过形成17对二硫键稳定白蛋白的三维构象，而第34位的Cys残基（Cys-34）则以游离巯基形式存在，是白蛋白重要的功能活性位点。白蛋白的三级结构呈心形，68%为α-螺旋，由结构域Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等三个结构域组成，每个结构域又各包含两个亚结构域。白蛋白由肝实质细胞合成后，进入内质网、高尔基体，经过一系列的修饰、加工和折叠，最终形成具有生物活性的白蛋白并分泌到血液中。分泌到细胞外的白蛋白又可通过细胞表面的新生儿Fc受体（neonatal Fc receptor,FcRn）介导的胞吞作用进入细胞，从而延长白蛋白的半衰期。白蛋白在体内的半衰期约为20 d，在这相对较长的循环过程中，白蛋白会发生多种酶促或非酶促的翻译后修饰，如氧化、亚硝基化、糖化等，这些修饰可引起白蛋白的结构和功能的改变，在生理稳态维持和疾病发生发展中具有重要意义。白蛋白的三维结构及主要翻译后修饰位点如图1所示。下面将对白蛋白主要存在的翻译后修饰进行概述。 图1 白蛋白的三维结构及主要翻译后修饰位点示意图1.1 氧化（Oxidation） 白蛋白的Cys-34携带一个游离巯基，承担了血浆主要的氧化还原活性。根据Cys-34的氧化还原状态可以将白蛋白分为三类：以还原形式存在的称为人巯基白蛋白（human mercaptalbumin, HMA），在健康的年轻人中占白蛋白总量的70%～80%；以可逆氧化形式存在的称为人非巯基蛋白1（human nonmercaptalbumin1, HNA1），其Cys-34和半胱氨酸、同型半胱氨酸、谷胱甘肽等含巯基的小分子作用形成混合二硫键，约占健康年轻人总白蛋白的20%～ 30%；以不可逆氧化形式存在的称为人非巯基蛋白2（human nonmercaptalbumin2, HNA2），Cys-34与亚磺酸或磺酸反应形成高度氧化的状态，在年轻健康人中占比最小，约2%～5%[2]。Cys-34是体内重要的抗氧化体系，该位点的氧化修饰会抑制白蛋白的抗氧化能力。此外，Cys-34氧化会导致白蛋白的构象发生改变。研究发现Cys-34的半胱氨酸化会改变整个结构域Ⅰ及结构域Ⅰ、Ⅱ的界面，从而影响胆红素以及其他配体的结合[8]。 除Cys-34外，白蛋白中甲硫氨酸（Met）残基也容易被氧化，包括Met-87，Met-123，Met-298，Met-329以及Met-446。此外，能发生氧化反应的氨基酸残基还包括赖氨酸（Lys-159）、精氨酸和脯氨酸。1.2 亚硝基化（Nitrosylation） Cys-34的亚硝基化是白蛋白另一种重要的翻译后修饰。生理状态下，血液中82%的一氧化氮（nitric oxide, NO）可以通过与Cys-34形成S-亚硝基硫醇与白蛋白结合，使得白蛋白成为NO的储存库，当血液中低分子量硫醇含量升高时，释放NO。这一结合不仅可以延长NO的生物活性，还使得白蛋白具有通过调控NO实现抗血栓的功能。在一些病理状态下，例如肝硬化患者局部组织中NO浓度升高，导致更多的HSA-NO复合物形成，Cys-34亚硝基化水平升高会降低白蛋白对铜离子、棕榈酸等的结合能力。此外，白蛋白138位、411位的酪氨酸（Tyr-138、Tyr-411）也易发生硝基化修饰，这两个氨基酸残基位于白蛋白配体结合部位，硝基化修饰会影响白蛋白对配体的结合，从而影响白蛋白正常功能的 发挥。1.3 糖化（Glycosylation） 白蛋白是一种非糖基化蛋白，但是在一定的条件下可自发、可逆、非酶促地与单糖结合而被糖化。Arg410和Lys525是最重要的糖化位点，此外，Arg114、Lys186、Lys199、Arg218、Lys281、Arg428、Lys439等位点也可能发生糖化修饰[9]。Arg410在白蛋白相关脂酶活性的发挥以及白蛋白对酮洛芬、苯二氮卓等药物的结合中有着必不可少的作用，Arg410的糖化导致白蛋白的构象发生改变，降低白蛋白的上述相关功能。早期的糖化产物经过一系列的氧化、重排、交联等反应，并进一步和白蛋白的游离氨基酸反应形成高级糖化终末产物（advanced glycation end products, AGEs），AGEs除了通过直接修饰白蛋白改变其结构和功能外，还可通过与特异性受体结合，引发级联炎症和氧化应激反应[10]。目前对白蛋白糖化的研究主要集中在糖尿病及相关并发症中。1.4 C-末端/N-末端切除（Truncation of N- or C-terminal） 正常生理条件下，白蛋白的C-末端结构域对维持白蛋白结构的稳定性和与FcRn的结合具有重要作用。N-末端金属离子结合位点可以螯合血液中的金属离子，对于发挥抗氧化作用具有重要意义[2]。在一些病理状态下，部分白蛋白的C-末端/N-末端会被切除。最常见的C-末端切除是亮氨酸（Leu）残基的缺失，该缺失会影响白蛋白的稳定性并缩短其半衰期。1.5 寡聚化（Oligomerization） 当机体内氧化压力增加，白蛋白可通过Cys-34形成分子间二硫键从而寡聚化，可形成二聚体、三聚体、四聚体等，其中二聚体最常见。由相同单体形成的二聚体称为同质二聚体，由不同的单体形成的称为异质二聚体。二聚化会占用游离的Cys-34，影响白蛋白的抗氧化、结合及转运能力。研究发现，在慢性肝病中二聚化的白蛋白比例增加，可作为潜在的诊断标志物[11]。1.6 乙酰化（Acetylation） 白蛋白是血浆蛋白中少有的非糖基化蛋白，这使得它更容易被乙酰化。阿司匹林可在Lys199、Lys402、Lys519以及Lys545等处与白蛋白共价结合使其乙酰化。乙酰化会影响白蛋白的结合能力。研究表明，乙酰化白蛋白对苯基丁氮酮的结合能力增加，而对胆红素的结合降低。体外实验发现，与阿司匹林结合后的白蛋白对前列腺素的亲和能力降低，加速了前列腺素的清除，从而增强阿司匹林的抗炎效果[9]。1.7 脱氢丙氨酸（Dehydroalanine, DHA）转化 在碱性或高热的条件下，白蛋白中的Cys-487残基可以被转化为DHA，这一转化加速了白蛋白的降解速度，并且影响Cys-487位点及附近位点的结合能力[12]。 此外，白蛋白还存在多种其他类型的翻译后修饰，如磷酸化、生物素化、氯化等。目前，上述修饰主要在体外实验中被观察到，其在体内是否普遍存在，及对白蛋白结构与功能影响缺乏系统的研究，尚需要进一步探讨。2 白蛋白的主要功能 除了维持血浆胶体渗透压这一核心生理作用外，人血白蛋白还具有抗氧化、结合运输、抗炎等多种重要的生理功能。2.1 维持血浆胶体渗透压与体液平衡 胶体渗透压与溶液内的大分子数目成正比，白蛋白作为血浆蛋白的主要成分提供的胶体渗透压占血浆总胶体渗透压的70%～80%。其中，约2/3的胶体渗透压由白蛋白自身的相对分子质量贡献；另外的1/3则来源于Gibbs-Donnan效应：生理条件下白蛋白为带负电荷的分子，会吸引带正电荷的分子进入血管从而增加血管内渗透压。鉴于此，白蛋白在临床上被广泛应用于扩充血容量。2.2 物质的结合与转运 白蛋白特殊的立体结构使其可以结合与转运多种内源性和外源性的物质。内源性物质主要包括脂肪酸、胆红素、胆固醇、甲状腺素及多种金属离子等；外源性物质主要包括华法林、布洛芬、紫杉醇等多种药物以及内毒素等有害物质。白蛋白通过不同的结合位点结合不同的物质，从而实现其多样化的结合与运输功能。白蛋白通过Cys-34与NO结合可作为NO的储存库，延长NO的生物活性，使得白蛋白具有通过调控NO实现抗血栓的功能[13]。白蛋白主要的药物结合位点有三个：白蛋白药物结合位点Ⅰ（albumin drugbinding siteⅠ, ADBS-Ⅰ），ADBS-Ⅱ和ADBS-Ⅲ。ADBS-Ⅰ主要与华法林、呋塞米等中心带负电荷的药物结合；ADBS-Ⅱ主要与地西泮、氟芬那酸等亲脂性分子结合；ADBS-Ⅲ可以与多种性质的分子结合，包括地高辛、抗肿瘤药物、抗生素等[1]。白蛋白与药物结合可提高药物在血液中的溶解性、控制药物释放速度、延长循环半衰期，同时可通过白蛋白相关受体介导实现靶向递送，这些作用都使得药物能够在体内更好地发挥功能。白蛋白结合胆红素、内毒素等毒性物质，减少其在血浆中的游离浓度，降低毒性，成为人体的“毒物处理器”[9]。此外，正常生理状态下白蛋白可结合β淀粉样蛋白（amyloid β-protein, Aβ）中的Aβ40（由40个氨基酸组成的Aβ最丰富的形式）与Aβ42，减缓Aβ聚集，进而减缓神经组织的 损伤[14]。2.3 抗氧化作用 白蛋白的抗氧化作用主要依赖Cys-34的自由基捕获功能。Cys-34提供了血浆约80%的游离巯基基团，承担了血浆约70%的自由基捕获功能，从而构成体内主要的抗氧化体系[15]。白蛋白中的甲硫氨酸、赖氨酸、精氨酸、脯氨酸等氨基酸残基也可被氧化，发挥抗氧化作用。此外白蛋白可通过与多种配体结合发挥抗氧化作用。血浆中的铜、铁离子与氧反应可形成活性氧基团，游离的铜、铁离子与过氧化氢发生Fenton反应可形成有害的羟基自由基。白蛋白与铜、铁结合，可减少其与过氧化物发生反应产生有害的羟基自由基。研究表明白蛋白与胆红素结合可抑制脂质过氧化，减少氧自由基对生育酚的损伤，并且可保护心肌细胞免受氧化损伤延长其在氧化压力下的存活时间[9]。多不饱和脂肪酸是血浆中重要的可氧化物，白蛋白通过与其结合抑制其氧化发挥抗氧化作用。近日，《Nature》发表的一项研究首次揭示了白蛋白在宿主防御毛霉菌病中的核心机制为结合并运输“抗真菌弹药”——游离脂肪酸，并通过白蛋白的抗氧化特性，保护游离脂肪酸不被氧化，维持活性[16]。2.4 抗炎和免疫调节 白蛋白的免疫调节作用很多与白蛋白的结合功能相关。白蛋白可与革兰氏阴性菌的脂多糖结合，可与革兰氏阳性菌的脂磷壁酸、肽聚糖结合，从而发挥抑菌作用[1]。白蛋白可剂量依赖性地增加T细胞的活化，动物实验发现白蛋白可能通过调节主要组织相容复合物Ⅱ（MHC Ⅱ）等与抗原递呈相关基因的表达来发挥免疫调节的作用。白蛋白还能通过抑制核因子κB（nuclear factor kappa-B, NF-κB）来减弱小鼠体内脂多糖诱导的肿瘤坏死因子α（TNF-α）等促炎因子的表达从而抑制炎症反应[17]。一项临床研究表明在伴有全身性炎症的急性代偿性肝硬化患者中使用白蛋白可减轻患者的全身性炎症反应，这一效应可能是白蛋白进入白细胞后通过Toll样受体调节细胞因子的表达实现[18]。缺氧诱导因子1（hypoxia inducible factor-1, HIF-1）在败血症的缺氧、炎症中发挥重要的调节作用。在一项兔内毒素血症模型中，外源白蛋白复苏降低了HIF-1的表达，从而改善了脂多糖诱导的组织缺氧和心肌萎缩[1]。此外，白蛋白中游离巯基可依据其氧化还原的状态介导炎症细胞的信号调节。2.5 止凝血调节 白蛋白由于和肝素具有相似的分子结构，可以与抗凝血酶Ⅲ共同作用加速灭活活化凝血因子Ⅹ（Ⅹa）。白蛋白通过Cys-34与NO结合形成复合物可舒缓血管，并抑制血小板聚集和活化[2]。白蛋白抗血栓的功能在临床试验中也有体现，一项临床研究表明透析时在血液体外循环中加入肝素与白蛋白可降低系统中抗凝剂的用量[19]。体外实验和动物模型表明，与生理盐水、羟乙基淀粉等相比，白蛋白溶液的加入可降低凝血异常的风险[20]。一项纳入18项临床试验的meta分析也证实上述结论：970例接受心脏搭桥手术的患者中，接受羟乙基淀粉灌注者比白蛋白灌注者出血更多[21]。2.6 维持血管内皮细胞的完整性 血管内皮是覆盖在血管内腔表面的一层扁平细胞，是血液与血管壁之间的屏障。内皮细胞表面衬有一层以糖蛋白、蛋白聚糖等多种血浆蛋白共同组成的凝胶状物质，即为糖萼层，糖萼在维持内皮细胞结构和功能的完整性中具有重要作用。白蛋白可通过其携带的电荷与糖萼结合。研究发现白蛋白对缺血再灌注模型毛细血管表面糖萼的损失具有保护作用，并能减轻失血性休克时糖萼的损伤，促进其恢复[22]。白蛋白可通过抑制促炎因子的氧化敏感转录因子保护血管内皮细胞免受氧化介导的损伤。此外，白蛋白还可降低内皮细胞中NO合成酶的活性、增加谷胱甘肽的含量，这些都对维持内皮细胞的功能具有重要意义[1]。研究发现，与羟乙基淀粉会增加多核白细胞与内皮细胞结合不同，白蛋白会抑制二者结合，可以保护内皮细胞免受炎症损伤。3 疾病状态下白蛋白的变化 如前文所述，目前白蛋白制品在临床上的适应证主要包括失血、创伤、烧伤引起的休克，脑水肿及损伤引起的颅压升高，肝硬化及肾病引起的水肿或腹水，低蛋白血症的防治等，这些适应证主要是利用白蛋白调节胶体渗透压的功能进行单一替代治疗，我们不再赘述。此处我们更多关注在糖尿病、肝病、阿尔茨海默病中白蛋白的研究进展，探寻白蛋白作为“多功能调控分子”在疾病中潜在诊断、治疗价值。3.1 糖尿病 糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢紊乱性疾病，体内长期高血糖生理环境对白蛋白产生多方面的影响。（1）白蛋白合成减少。在兔糖尿病模型中，包括白蛋白在内的多种肝脏合成蛋白的合成量较正常对照组减少。肝脏合成总蛋白减少约60%，白蛋白减少约24%，总分泌蛋白减少约44%。（2）糖化白蛋白增加。正常生理状态下白蛋白是非糖基化血清蛋白，因为它缺少N糖基化必需的基团，但在长期高血糖环境下会导致白蛋白非酶促化糖化程度增加。正常人体内糖化白蛋白的比例为6%～10%，而糖尿病患者中这一比例可升高至20%～30%。糖化通常会导致蛋白质交联、聚集等，改变蛋白质的正常结构进而影响其功能。白蛋白的糖化会改变其立体构象、影响白蛋白的结合转运、抗氧化等功能。此外，糖化白蛋白免疫原性增强，诱发机体产生糖化白蛋白抗体，并可通过与免疫细胞表面受体作用激活免疫反应[23-24]。这些改变对慢性糖尿病综合征的发生、发展有很大影响。3.2 肝病 肝病是指由于各种原因导致肝细胞炎性反应和损伤，包括病毒性肝炎、酒精性肝炎、肝硬化等。白蛋白主要由肝脏合成分泌，肝脏病变其合成功能减退，导致人体内白蛋白数量减少，同时白蛋白的结构也会发生改变。与健康人白蛋白相比，肝病患者白蛋白脂肪酸、胆红素的结合量更高，由于结合物增加，肝病患者白蛋白的构象也随之发生改变。实验表明，肝病患者的白蛋白因结合了更多的脂肪酸导致结构域发生旋转，结构域Ⅰ和结构域Ⅲ更加开放[25]。肝病患者体内不同氧化还原状态白蛋白的比例发生改变，还原态的人巯基白蛋白（HMA）比例下降，氧化态的人非巯基蛋白（HNA1、HNA2）比例增高。在肝病患者中，HMA、HNA1、HNA2含量范围分别为：（46±13）%、（44±12）%、（9±4）%，健康人对照三者的含量分别为：（65±4）%、（31±4）%、（4±1）%[26]。白蛋白中脂肪酸、胆红素的结合量以及其氧化还原状态和疾病的严重程度有关。 肝硬化患者体内白蛋白除了含量发生变化外，还经历可逆或不可逆的结构、功能改变。除了上述Cys-34的氧化还原状态的改变，还有研究发现没有糖尿病的肝硬化患者白蛋白糖化修饰也会增加[27]。此外，在肝硬化患者中白蛋白N-末端存在天冬氨酸-丙氨酸（Asp-Ala）残基切除，影响其抗氧化功能的正常发挥[2]。由于存在结构和功能受损的白蛋白，研究人员提出“有效白蛋白”（effective albumin concentration, eAlb）的概念，有效白蛋白是指保持完整结构及功能的天然非修饰白蛋白。2021年，Caraceni等提出有效白蛋白的量化公式：有效白蛋白（g/dL）=总白蛋白（g/dL）×天然白蛋白相对含量（%）/100[28]，即使用液相色谱-电喷雾电离-质谱法分析天然白蛋白的相对量，以及标准的溴甲酚蓝绿法定量测定总白蛋白量，再通过上述公式计算出有效白蛋白的含量。测定有效白蛋白的浓度可以更有效地评价患者的白蛋白功能水平，对指导肝病等疾病患者临床治疗和预后具有重要价值。但因为不同肝功能以及不同肝脏病理和生理情况下，白蛋白的翻译后修饰不尽相同，导致有效白蛋白的量化未能标准化，所以还需要更多的研究来寻找更准确、更简单、更易推广的有效白蛋白的检测方法。3.3 阿尔茨海默病（AD） AD是一种中枢神经系统的退行性病变，主要特征包括进行性的认知功能障碍和行为损害。AD发病机理极其复杂，Aβ假说是其中之一：大脑中Aβ的异常产生与清除失衡，导致其聚集形成可溶性寡聚体和不溶性淀粉样斑块，进而触发神经元损伤、Tau蛋白异常磷酸化形成神经原纤维缠结，最终导致认知功能障碍。白蛋白不仅是血浆中含量最多的蛋白质，同时也是脑脊液中最主要的蛋白。白蛋白能够通过与Aβ40和Aβ42结合形成复合物、通过C-末端抑制Aβ的自聚集、以及降解Aβ聚集物等功能发挥对神经系统的保护作用[29]。研究发现AD患者血浆中白蛋白的糖化比例明显增加，脑脊液中总的白蛋白糖化比例较正常人无明显差异，但是糖化亚型不同[30]。与正常人相比，在轻中度AD患者血浆中，还原态HMA显著下降（54.1% vs 65.2%；P＜0.000 1），可逆氧化态HNA1比例增加（42.8% vs 32.5%；P＜0.000 1）。而在AD患者的脑脊液中，不可逆氧化态HNA2比例大幅增加（52.8% vs 7.4%；P＜0.000 1）[31]。此外，AD患者的脑脊液和血浆中白蛋白的硝基化水平增高，硝基化除影响白蛋白正常结构和功能外，还使得白蛋白更容易发生聚集，导致白蛋白在抑制Aβ的聚集等方面功能减弱[32]。AD患者体内白蛋白结构的变化阻碍了正常生理功能的发挥，这也表明白蛋白可能在AD的治疗中协同发挥作用。多项AD多靶点联合治疗的临床试验中在血浆治疗时联合白蛋白取得了积极的临床疗效，减缓了病情的进展[29]。4 白蛋白制品：重组白蛋白与人血白蛋白 白蛋白制品是我国市售血制品中用量最大的产品，其适应证主要包括失血创伤、烧伤引起的休克，脑水肿及损伤引起的颅压升高，肝硬化及肾病引起的水肿或腹水，低蛋白血症的防治和新生儿高胆红素血症等。目前临床使用的白蛋白制品绝大部分是从人血浆中分离纯化得到的pdHSA，但血浆来源有限，且有传播病毒的风险。以我国为例，受血浆资源短缺的影响，HSA制品供不应求，进口HSA制品占比超过60%，对临床用药安全和国家的医疗保障体系形成一定的压力。为突破血浆资源限制，研究人员利用基因工程重组技术开发生产rHSA，为HSA制品的可持续供应提供新的解决途径。目前国产rHSA注射液已在俄罗斯、吉尔吉斯斯坦以及国内陆续上市，全球范围内多家rHSA制品已完成或正在开展临床试验。但目前rHSA在我国批准的适应证仅为肝硬化伴低蛋白血症（≤30 g/L）的治疗。现阶段已上市或者在进行临床试验的rHSA均来源于水稻或酵母[7]。rHSA与pdHSA具有相似的结构和生理功能，但由于来源、生产工艺的不同使得两种白蛋白在翻译后修饰、结构以及功能上存在差异。本部分将系统比较rHSA与pdHSA在结构、功能以及安全性等方面的异同，旨在为rHSA的合理应用和评价提供理论依据。4.1 结构比较 rHSA与pdHSA具有相同的分子量、氨基酸顺序、N-末端、C-末端氨基酸残基。两者均含有35个半胱氨酸残基，其中34个形成17个二硫键，Cys-34保留游离巯基。圆二色谱检测表明两者具有相似的二级结构和三级结构。两种HSA的三级结构均呈心形，由三个螺旋结构域组成，但是由于来源、制备过程不同，rHSA与pdHSA也存在一些组成和结构上的差异。表达宿主的不同导致rHSA与pdHSA的翻译后修饰存在差异。有研究表明水稻源rHSA因特定部位脂肪酸结合而使其亚结构域ⅠA和ⅡA发生改变，并伴随部分二硫键构象和氨基酸侧链结构改变，且亚结构域ⅠA和ⅡA中的色氨酸、酪氨酸等外露使其表面电荷也有所改变，以上结构的改变导致水稻源rHSA和pdHSA在整体结构上存在细微差异[33]。相比pdHSA和酵母源rHSA，水稻来源的rHSA存在更多糖化赖氨酸和精氨酸残基，且其糖化水平可能影响rHSA的四级结构[34]。本课题组前期研究发现国内厂家的pdHSA与rHSA（包括酵母源和水稻源）在多种翻译后修饰方面存在差异，具体包括乙酰化、琥珀酰化、巴豆酰化、磷酸化、β-羟基丁酰化、乳酸化等六种翻译后修饰无论在修饰位点还是修饰程度上均表现出明显不同[35]。白蛋白的琥珀酰化、巴豆酰化、β-羟基丁酰化、乳酸化修饰目前研究较少，尚无明确的生物学功能，后续需进一步明确这些翻译后修饰对白蛋白功能的影响。从结构及组成均一性的角度来看，rHSA在均一性方面优于pdHSA。pdHSA由大量健康人血浆混合后分离纯化并经病毒灭活制成，不同血浆捐献者HSA本身的生理差异及生产工艺过程的影响，均可能导致pdHSA的结构变化，从而使不同批次或不同厂家的pdHSA制品之间存在异质性[36-37]。此外，高效液相色谱分析结果表明，rHSA比pdHSA含有更多的还原态白蛋白（29.0% vs 22.1%）、更少的不可逆氧化白蛋白（14.9% vs 22.3%）[37]。4.2 杂质成分比较 分离纯化并不能完全除去杂质蛋白，因此无论是pdHSA还是rHSA中均含一定量的杂蛋白。《中国药典（2025版）》规定人血白蛋白的纯度应不低于蛋白总量的96%。刘颖等对我国五家企业共计323批pdHSA的纯度分析显示，五家企业的人血白蛋白产品纯度在96.2%～98.3%，企业间差异较大[38]。柯兵兵等利用电喷雾质谱检测国内上市的27家企业28批pdHSA中杂蛋白，各企业杂蛋白数量分布在8～17种之间，企业间共有杂蛋白包括载脂蛋白A-Ⅱ、人结合珠蛋白、人色素结合蛋白、α-1B糖蛋白与α-2-HS糖蛋白等，27家企业杂蛋白种类数量差异较大[39]。德国的一项调查发现，奥克特珐玛、百特、基立福和杰特贝林四个厂家的人血白蛋白产品中有18种杂蛋白，主要杂蛋白种类与前述研究相同[40]。本课题组前期通过改良的基于质谱的4D无标记（4D label-free）定量蛋白质组学方法检测国内六个厂家pdHSA中杂质蛋白的种类，共发现456种杂质蛋白，其中96种在所有厂家产品中存在[41]。本课题组发现的杂质蛋白的种类多于此前的研究，可能是随着分析技术的进步，有更多低丰度的杂蛋白被检出。 与pdHSA相比，rHSA具有更高的纯度，rHSA中的杂蛋白主要为难以去除的宿主残留蛋白。酵母表达的rHSA纯化结合了超滤、离子交换层析、亲和层析等步骤，其白蛋白纯度可达99.95%，甚至有纯化工艺可得到纯度为99.99999996%、宿主蛋白含 量＜0.1 ng/g的终产品。从水稻中纯化rHSA比从酵母中更省时、省力、高效，水稻来源的rHSA纯度可达99.9999%[42]。本课题组通过改良的基于质谱的4D label-free蛋白质组学方法检测到水稻来源和酵母来源rHSA中的杂质蛋白，在酵母来源的rHSA中检测到52种杂质蛋白，而在水稻来源的rHSA中检测到 152种[41]。 需要指出的是，相比于rHSA，虽然pdHSA中含有更多种类的杂质蛋白，但是pdHSA中的杂质（称为伴随蛋白更为合理）都是来源于人血浆本身，对白蛋白的生理功能有可能有协同作用。如人血浆中存在的1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate, S1P）具有参与细胞增殖、维持内皮细胞糖萼等功能。本课题组前期研究发现pdHSA中均含有S1P，而rHSA中未检出，这一差别可能会使白蛋白在一些治疗效果上存在差异[43]。rHSA中的杂质蛋白主要来源于表达宿主，虽然种类较少，但对于人体而言均为异种成分，有可能诱发机体产生免疫反应。4.3 功能比较 rHSA作为pdHSA的临床替代品，具有与pdHSA相似的生理功能。在结合和转运物质方面，rHSA在与华法林、布洛芬、甲氧萘丙酸等的结合功能上与pdHSA相似[44]。白蛋白作为真核细胞生长和生存所必需的生物活性成分广泛用于细胞培养。rHSA同pdHSA一样具有促进CHO细胞增殖的功能[45]。同位素标记显示在大鼠体内rHSA（重组人血清白蛋白）与pdHSA在组织分布、血液半衰期以及尿液代谢等方面都无显著差异。用于治疗兔肝腹水时，rHSA可剂量依赖性地缓解疾病状态，与同剂量的pdHSA具有相似的疗效[45]。也有不少研究显示rHSA与pdHSA存在一定的差异。本课题组通过表面等离子共振技术分析发现pdHSA与S1P亲和力比rHSA更强，但rHSA对S1P的负载量较pdHSA更高[43]。体外比较不同来源白蛋白对血管内皮细胞生物学效应时发现pdHSA对血管内皮细胞增殖活性、细胞周期、细胞迁移等影响较rHSA更显著[46]。此外，程露等比较不同来源白蛋白对人CD34+干细胞培养的影响发现pdHSA对干细胞的培养效果优于rHSA，可能与不同来源白蛋白翻译后修饰的差异有关[47]。但也有研究报道对人单核细胞系U937以及THP-1体外培养中，rHSA有更好地促进细胞增殖的能力[48]。 早期，rHSA主要用于体外细胞培养和药物佐剂等非临床注射用途。作为无血清培养基补充剂用于细胞培养，为细胞生长提供氮和必需氨基酸，维持细胞培养环境中的渗透压平衡。用于疫苗的稳定剂和佐剂，为多种疫苗的生产提供辅助功能。rHSA还可用作干细胞冷冻保存，其缓冲能力可保持细胞完整性所必需的pH平衡，同时其稳定能力可使细胞保持悬浮状态，从而延长细胞在冷冻保存期间的活力。此外，rHSA还可以作为药物载体，延长药物体内循环时间、增强药效。近年来，针对rHSA用于静脉注射的安全性和疗效的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验在世界许多实验室和临床中心相继展开。临床研究表明rHSA与pdHSA在安全性、耐受性、药理学以及药代动力学等方面具有相似性[49]。目前rHSA在俄罗斯、吉尔吉斯斯坦以及国内获批上市[7，50]，但其长期安全性还有待进一步考察[51]。5 总结与展望 HSA作为血浆中含量最高的蛋白质，不仅在维持血浆胶体渗透压和血容量稳态中发挥关键作用，还依赖其独特的结构特征和丰富的配体结合能力，深度参与物质转运、氧化还原稳态调控、炎症反应调节、血管内皮功能维持以及止凝血平衡等多种生理与病理过程。随着相关研究的不断深入，HSA的生物学内涵已逐步突破传统替代治疗的范畴，显现出作为多功能调控分子的潜在治疗价值。然而，当前对HSA作用机制的认识仍呈现碎片化特征，其在不同疾病状态下的功能异质性及其分子基础尚缺乏系统而深入地阐释。 未来HSA的研究亟待从单一替代治疗视角转向“多功能生物分子”的机制驱动研究范式。一方面，应结合结构生物学、蛋白质组学等手段，系统解析HSA翻译后修饰（如氧化、糖化和亚硝基化等）及构象变化对HSA配体谱、受体相互作用及下游信号通路调控的影响，明确其在炎症反应、免疫失衡、血管损伤及器官功能障碍中的作用模式。另一方面，在疾病特异性背景下，依托临床队列与动物模型，深入揭示HSA翻译后修饰状态与疾病发生发展之间的关联，阐明其在不同病理条件下的功能重塑及其他生物学意义。在此基础上，针对pdHSA与rHSA之间潜在的结构和功能差异，通过多组学整合分析与功能验证模型，明确不同来源HSA在结构特征、生物活性和疾病干预效应方面的共性与差异性，为其精准、规范的临床应用提供坚实的理论依据。总体而言，这一研究路径有望推动HSA由传统单一替代治疗制剂向机制明确、功能可设计的生物治疗分子转变，为其创新应用和精准医学实践奠定理论基础。 利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突 作者贡献声明 孙盼：论文撰写、投稿；闫晨：文献查阅、论文撰写；陈永莹：文献查阅；蒋鹏：文献查阅，论文修改；秦亮：文献查阅，论文修改；杨波波：文献查阅；邓晋朝：文献查阅；李长清：论文设计指导、经费支持；王宗奎：研究指导、论文修改；马莉：论文审阅、经费支持 参 考 文 献（略） 戳这里，阅读原文